核酸染料是分子生物学实验中不可或缺的试剂，其中溴化乙锭(EtBr)因其高灵敏度，长期以来一直被用作核酸染色的标准染料。但是EtBr具有潜在的诱变和致癌作用，EtBr能与DNA嵌合，引起细胞突变，长期接触可能对人体健康产生负面影响。NIPPON GENETICS推出的新型MIDORIGreen系列核酸染料，是一种非致癌性和非致突变性的染料，无法穿透乳胶手套和细胞膜。同时致突变性试验（Ames试验）和细胞毒性试验均为阴性，因此是一种高安全度的核酸染料[1]。

紫外光与EtBr染色至今仍一起被用于分子生物学实验室中检测核酸。然而紫外光谱会导致DNA样品的修饰和降解，30秒的紫外线曝光足以大幅降低克隆效率。蓝/绿LED在470 nm - 520 nm处发出安全可见光，这种光谱对 DNA 没有破坏性，与紫外光相比，DNA完整性和克隆/测序效率完全不受影响，即使在长时间的光照下也是如此。MIDORIGreen系列核酸染料经过优化，可在紫外光或蓝/绿光激发时获得更亮的信号，同时也兼容紫外光。

图1：EtBr和MIDORIGreen吸收光谱对比

MIDORIGreen产品特点

      出色的信号质量

      用于凝胶内染色和后染色的安全核酸染料

      溴化乙锭的安全替代品：非致癌无毒

      适用dsDNA、ssDNA或RNA染色

      胶染法和泡染法均可

MIDORIGreen Advance

MIDORIGreen Advance灵敏度与EtBr相当，可以直接添加到熔融的琼脂糖中。同时兼容紫外线或蓝/绿LED，因此无需更改原有的实验步骤。MIDORIGreen Advance的稀释倍数可高达1：25000。100 mL琼脂糖凝胶只需4μL至6μL，每1mL的染料可配置约17L至25L琼脂糖凝胶。

MIDORIGreen Direct

MIDORIGreen Direct中已经包含10X Loading Buffer，可以直接添加到核酸样品中，无需将其或任何其他染料添加到凝胶基质。相较于在凝胶中添加染料的染色方式，核酸的直接染色消除了背景染色，提供了完美的信噪比。1 mL的 MIDORIGreen Direct足够提供1,000至2,000个样品的染色。

MIDORIGreen Direct可以为下游提供更好的结果。

从琼脂糖凝胶中分离核酸可以进一步下游应用，许多染料，如EtBr甚至SYBR™ Green，由于其嵌入特性，都是强酶抑制剂。而MIDORI Green 染料与 DNA 骨架结合的方式能为下游应用带来更高的效率，包括克隆、测序、PCR等。[2]

MIDORIGreen Xtra

MIDORIGreen Xtra是NIPPON GENETIC最新一代核酸染料，针对蓝/绿LED和蓝LED光源进行了优化，可以在琼脂糖凝胶中产生强荧光信号。同时MIDORIGreen Xtra不会对琼脂糖凝胶进行染色，因而具有很低的背景噪音，从而获得出色的信噪比。由于非常低的背景荧光，这使得识别少量 DNA 变得非常容易，因此MIDORIGreen Xtra具有超高灵敏度。

图3：使用MIDORI Green Xtra检测的DNA条带具有超高灵敏度（注：左图使用蓝色/绿色 LED 透射仪进行检测；右图使用蓝色LED透射仪进行检测。）

MIDORIGreen easy

MIDORIGreen easy具有与MIDORIGreen Xtra相同的出色信号质量和低背景，拥有比EtBr更好的信号，MIDORIGreen easy的开发是为了可以轻松替换SYBR®safe，同时染色方案不需要改变。MIDORIGreen Easy的稀释倍数可高达1：10000，100 mL琼脂糖凝胶只需8μL至10μL。

图4：MIDORIGreen easy（左）与MIDORIGreen Xtra（右）使用蓝/绿 LED 激发灯。

MIDORIGreen系列检测光谱与灵敏度

注: √表示兼容；⭕表示兼容但不推荐；

MIDORIGreen核酸染料系列产品列表

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