#流式细胞术细胞内染色方法介绍
流式细胞术及细胞内蛋白质生物标记物免疫染色技术，为细胞表型和功能特性的研究和临床诊断开辟了多种新的选择。事实上，某些细胞类型的表型鉴定需要同时标记细胞表面和细胞内的标记物。此外，典型膜分子的细胞质定位被证明是最可靠的谱系标记物，如未分化白血病的胞质CD3和CD22。因此，许多细胞生物学和功能研究中，细胞内免疫染色是必要的。为此，Nordic-MUbio公司提供了一类先进的FIX&PERM®细胞固定/透化试剂产品，使得我们在分析细胞内抗原时，变得与分析细胞表面抗原一样容易。
#FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒介绍
FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒包含2种试剂：固定试剂（试剂A）和破膜试剂（试剂B）。首先用试剂A将细胞固定在悬浮液中，然后用试剂B渗透细胞膜，这个过程使抗体能够进入细胞内结构，并使细胞的形态散射特征保持完整，特定配方在减少背景的同时，允许同时添加破膜试剂和荧光染料标记抗体，用于膜蛋白及胞内成分的染色，如胞浆酶、核蛋白、癌蛋白、细胞因子、免疫球蛋白等。FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒适用于所有市售流式细胞仪，可分析来自各种人类生物样本（血液，骨髓等）的正常和恶性白细胞群。
货号
产品名称
规格
产品介绍
GAS-002
FIX&PERM® Kit
8*5ml
FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒，适用于使用流式细胞术分析来自各种人类生物样本（血液，骨髓等）的正常和恶性白细胞群。
GSA-002-1
FIX&PERM® Kit 1000
2*100ml
GAS-002M
FIX&PERM® Sample Kit
2*5ml
GSA-002A-1
FIX&PERM® Solution A(Fix)
1*100ml
FIX&PERM® Kit中的固定试剂A，用于细胞固定
GSA-002B-1
FIX&PERM® Solution B(Perm)
1*100ml
FIX&PERM®
Kit中的破膜试剂B，用于渗透细胞膜
FIX&PERM®细胞固定/透化试剂系列产品列表
# FIX&PERM®细胞固定/透化试剂优势
- 温和固定细胞，保留其流式细胞仪散点特性
- 可同时表征细胞内和细胞表面标志物
- 整个过程不到一小时，随时分析或储存24小时
- 严格的QC程序，用质控血样测定每批的质量，分析比较得到白细胞群的散点特征，保证批间结果的一致性和可靠性
-
不含挥发性有机溶剂，可以在室温条件运输和储存
- 适用于一系列针对细胞膜和细胞内抗原的单克隆抗体
#FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒在血液恶性肿瘤研究中的应用
血液恶性肿瘤，如白血病和淋巴瘤，是一种始于骨髓等血液形成组织细胞的癌症。Ki-67是位于细胞核内的细胞增殖标记物，在这些血源性癌症患者中表达水平对临床有一定指示作用。在组织病理学中常用免疫组织化学方法检测Ki-67，而流式细胞术应用的较少，因此在不同来源的骨髓细胞群中可检测到的参数有限。 Nies等人利用流式细胞术分析了解Ki-67在癌症患者中的表达，通过对Ki-67在骨髓造血、单核细胞生成和造血细胞成熟阶段的表达情况分析，建立健康个体对于不同造血细胞谱系的参考值。采用FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒结合Ki-67免疫染色和流式细胞仪软件测定不同成熟途径中细胞的增殖变化。因此，可以在不同的血细胞谱系和成熟阶段确定这个细胞周期参数的参考值。
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FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒适用的部分小鼠抗人单克隆抗体产品列表
|
Antigen |
Clone |
Isotype |
Format |
Quantity |
Cat. No. |
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CD3 |
UCHT1 |
IgG1 |
Purified |
0.2 mg |
GM-4011 |
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FITC-labeled |
100 tests |
GM-4012 |
|
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|
PE-labeled |
100 tests |
GM-4013 |
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CD22 |
RFB4 |
IgG1 |
Purified |
0.2 mg |
GM-4051 |
|
|
|
|
FITC-labeled |
100 tests |
GM-4052 |
|
|
|
|
PE-labeled |
100 tests |
GM-4053 |
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MPO-C2 |
8E6 |
IgG1 |
Purified |
0.2 mg |
GM-4191 |
|
|
|
|
FITC-labeled |
100 tests |
GM-4192 |
|
|
|
|
PE-labeled |
100 tests |
GM-4193 |
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Lactoferrin |
4C5 |
IgG1 |
Purified |
0.2 mg |
GM-4111 |
|
|
|
|
PE-labeled |
100 tests |
GM-4113 |
|
Lysozyme |
LZ-2 |
IgG1 |
Purified |
0.2 mg |
GM-4131 |
|
|
|
|
FITC-labeled |
100 tests |
GM-4132 |
|
CD68 |
Ki-M7 |
IgG1 |
FITC-labeled |
100 tests |
GM-4152 |
Nordic-MUbio是荷兰的一家知名的免疫学试剂生产厂家，2013年2月14日，Nordic收购MUbio并正式更名为Nordic-MUbio。同年12月，收购An Der Grub Bio Research GmbH ( ADG )，增加FIX&PERM®细胞固定/透化试剂产品线。Nordic-MUbio严格遵守IS09001标准生产高质量的抗体，主要包括针对细胞粘附蛋白、核蛋白和骨架蛋白等抗体，80%以上的抗体经过冷冻组织免疫组化检测，近70%的产品通过流式细胞术验证，50%的产品通过WB验证。同时Nordic-MUbio也是斑马鱼抗体开发的引领者，拥有50多种可用于斑马鱼荧光检测的抗体。更多免疫学产品信息欢迎致电tyc1286太阳集团全国客服热线400-050-4006或登录官网查询和了解。
参考文献：
- Nies, K.P.H. et al. Determination of the proliferative fractions in differentiating hematopoietic cell lineages of normal bone marrow. Cytometry A. 2018 93(11):1097-1105. PMID: 30176186.
- Integration of the Ki-67 proliferation index into the Ogata score improves its diagnostic sensitivity for low-grade myelodysplastic syndromes. Leuk Res. 2022 Feb;113:106789. doi: 10.1016/j.leukres.2022.106789.
- Optimized gating strategy and supporting flow cytometry data for the determination of the Ki-67 proliferation index in the diagnosis of myelodysplastic syndrome. Data Brief. 2022 Feb 22;41:107976. doi: 10.1016/j.dib.2022.107976.
-
Determination of the proliferative fractions in differentiating hematopoietic cell lineages of normal bone marrow. Cytometry A. (2018) 93, 1097-1105 . doi: 10.1002/cyto.a.23564
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